تأثير هم كشتي سلولهاي گرانولوزا و رتينوئيك اسيد بر بلوغ و تكوين تخمكهاي نارس موش در محيط آزمايشگاه

Anatomical Sciences Journal (نام قديم مجله علوم تشريح ايران)

دوره 5 - شماره 19-20

نوع مقاله: ---- Unspecified ----
چكيده:

هدف: بهبود محيط كشت بلوغ آزمايشگاهي (IVM) تخمكهاي نارس با هم كشتي سلولهاي گرانولوزا و رتينوئيك اسيد
مواد و روشها: تحقيق حاضر به روش تجربي انجام شد. تخمكهاي نابالغ ازتخمدانهاي موشهاي مادα نژاد NMRI در سن 8-6 هفتگي از تخمدانها جمع آوري شدند و در محيط بلوغ ‌ MEM-α ’s Minimum Essential Medium; MEM- α) (Eagle حاوي‌ 100 ميلي‌IU در ميلي ‌ليترrFSH (recombinant Follicle Stimulating Hormone)،هفت و نيم IU در ميلي‌ليتر ( hCG (human Chorionic Gonadotropin، پنج درصد Fetal Calf Serum) FCS)، دو ميكرومولار رتينوئيك اسيد همه ترانس (t- RA: All- trans Retinoic Acid) و سلولهاي گرانولوزا كشت شدند. اتانل 2/0 درصد (گروه شم) به عنوان حلال انتخاب شد. پس از گذشت 24 ساعت، تخمكهايي كه بلوغ يافته بودند، در محيط T6 با اسپرم لقاح يافتند و براي مدت 5 روز كشت داده شدند. سپس تكوين آنها به مراحل مورولا و بلاستوسيست مورد مطالعه قرار گرفت.
يافته‌ها: رتينوئيك اسيد پيشرفت و از سرگيري ميوز را حمايت مي كند و بلوغ تخمك، تشكيل مورولا و بلاستوسيست را نسبت به گروه كنترل افزايش مي دهد. زماني كه 2 ميكرو مولار t- RA و سلولهاي گرانولوزا در محيط كشت IVM حضور نداشتند از لحاظ آماري ميزان بلوغ كمتري مشاهده شد و در پي آن درصد جنينهايي كه به مرحله بلاستوسيست رسيدند كاهش پيدا كردند. در حالي كه، با حضور 2ميكرو مولار t- RA و سلولهاي گرانولوزا در محيط كشت
(IVM (In-Vitro Maturation نتايج بهتري در مقايسه با گروه كنترل به دست آمد.
نتيجه‌گيري: نتايج به دست آمده نشان مي دهد، هم كشتي سلولهاي گرانولوزا همراه با 2 ميكرومولار رتينوئيك اسيد طي بلوغ آزمايشگاهي تخمكهاي نارس موش، سبب افزايش بلوغ و بهبود تكوين جنينهاي حاصل از آنها مي شود.

The Effect of Granulosa Cells Co-culture and Retinoic Acid on Maturation and Development of Immature Mouse Oocytes In Vitro
Article Type: ---- Unspecified ----
Abstract:

Purpose: The purpose of this study was to develop an appropriate medium for in vitro maturation (IVM) of immature mouse oocytes.
Materials and Methods: Germinal vesicle of female NMRI mouse oocytes (6-8 weeks old) were collected from ovaries and cultured in maturation medium MEM-α, supplemented with: 100 mlIU/ml rFSH + 7.5 IU/ml hCG + 5% FCS (Control group) and 2 µM all- trans retinoic acid (t-RA) in presence or absent of granulose cells. Ethanol (Sham group) 0.2% (v/v) used as solvent. After 24 hours the matured oocytes were fertilized with spermatozoa in T6 medium and cultured for 5 days. Cultured immature oocytes development to the morula and blastocyst stages was studied.
Results: The retinoic acid supported progression and resumption of meiosis and also increased advancing the oocytes to Metaphase II, formation of morula and blastocyst compared to control group. When there were not 2 µM t-RA and granulose cells in IVM medium, significantly lower maturation rates were observed, followed by a decrease in the percentage of embryos reaching the blastocyst stage. Whereas, when 2 µM t- RA and granulose cells monolayer were present in the IVM medium, better results in comparison with control group were obtained.
Conclusion: Results attest that co-culture of granulose cells with 2 µM all-trance retinoic acid during in vitro maturation enhanced mouse oocytes maturation and improved embryonic development.

قیمت : 20,000 ريال