تشخيص كلوناليتي در كودكان مبتلا به لوسمي لنفوبلاستي حاد از نوع پيش سازهاي β با ارزيابي بازآرايي ژن زنجيره سبك (كاپا)و سنگين ايمونوگلوبولين

مجله علوم پزشكي دانشگاه آزاد اسلامي تهران

دوره 16 - شماره 1

نوع مقاله: ---- Unspecified ----
چكيده:

سابقه و هدف: بازآرايي قطعات ژني در مسير تكاملي لنفوسيت هاي B وT تنوع زيادي در مولكولهاي زنجيره سبك (كاپا) و سنگين دارد. در لوسمي هاي لنفوئيد از نوع B-precursor ALL بازآرايي ژن زنجيره سنگين به عنوان شايعترين و بازآرايي ژن زنجيره سبك كاپا نيز در BP-ALL به ميزان نسبتا" شايع گزارش شده است. هدف از مطالعه حاضر بررسي الگوي بازآرايي ژنهاي زنجيره سبك (كاپا) و سنگين ايمونوگلوبولين در ALL كودكان از نوع پيش سازهاي B توسط واكنش زنجيره پليمراز (PCR) مي باشد.
روش بررسي: در مطالعه تجربي حاضر 183 كودك با تشخيص اوليه ALL قبل از شروع درمان مورد بررسي قرار گرفتند. پس از ارزيابي مورفولوژي (41%=L2 و 44%=L1) و ايمونوفنوتيپ تنها 140 بيمار با تشخيص B-precursor ALL براي مطالعه انتخاب شدند. پس از استخراج DNA آزمايش PCR به منظور تكثير منطقه خيلي متغير CDRIII) IgH و CDRI) وIgx با استفاده از پرايمرهاي مشترك انجام شد. محصولات PCR پس از آناليز هترودوپلكس والكتروفورز برروي ژل پلي آكريلاميد و رنگ آميزي نقره مورد بررسي قرار گرفت. آناليز آماري با برنامه نرم افزاري (SPSS (version 11.5 انجام شد.
يافته ها : 114(4/90%) نفر از بيماران داراي بازآرايي كلونال درژن IgH با استفاده از پرايمرهاي مشترك نواحي CDR-III وCDR-I بودند (منوكلونال 8/57%، باي كلونال 9/34% و اوليگوكلونال5/5%). 4 بيمار از 9 بيمار مبتلا به(TALL (44/4% داراي بازآرايي كلونال IgH بودند. الگوي كلونال Igx-Kde در 59 (67%) بيمار از موارد BP-ALL وجود داشت (10% باي كلونال). بيشترين بازآرايي مربوط به گروه(VKI (25% و (VKIII (22/7% بود.
نتيجه گيري: الگوي كلونال ژن IgH مشابه جوامع ديگر بود. استفاده توام از پرايمرهاي FRI و FR III در يك واكنش بصورت Multiplex PCR كه براي اولين بار گزارش مي شود علاوه بر افزايش تشخيص بازآرايي IgH، زمان رسيدن به نتيجه را كاهش داده و وجود بازآرايي را مي توان توسط هر دو تائيد كرده و از منفي كاذب جلوگيري نمود. الگوي كلونال Igx-Kde كمي بيش از گزارشهاي قبلي بوده و شايعترين بازآرايي (VxI (25% بود. هيچ ارتباط معني داري بين انواع مختلف بازآرايي و متغيرهاي كمي وجود نداشت.

Molecular diagnosis of clonality in B-precursor acute lymphoblastic leukemia of children using immunoglobulin heavy and kappa light chain gene rearrangements
Article Type: ---- Unspecified ----
Abstract:

Background: Enormous diversities of heavy chain immunoglobulin (IgH) & IgK molecules are generated during B- and T-lymphocyte differentiation through the rearrangement of gene segments. Additionally, random insertion and deletion of nucleotides between gene segments make unique sequences which are cell or clone specific. IgH and IgK gene rearrangements are the most and relatively common reported rearrangements in B-precursor acute lymphoblastic leukemia, respectively. The purpose of this study is to evaluate the pattern of IgH and IgK gene rearrangements using polymerase chain reaction (PCR) in BP-ALL in Iranian children.
Materials and methods: For this prospective study, bone marrow aspirates of 183 patients with the diagnosis of acute leukemia were collected at admission before any chemotherapy. Having reviewed cytomorphology (L1:44%, L2:41%) and immunophenotyping, only 140 cases with the diagnosis of B-precursor ALL were selected. Mononuclear cells including leukemic blasts were isolated by density gradient. Having DNA extracted, hyper-variable regions of IgH and IgK were amplified by consensus primers using PCR. PCR products were analyzed after heteroduplex analysis and polyacrylamide gel electrophoresis (silver stain). The DNA sequences were compared and aligned to the sequences homologous for IgH and IgK published by Gene Bank.
Results: IgH gene rearrangements were found in 114 (90.4%) of patients using consensus primers for CDR-III and CDR-I regions (monoclonal 57.8%; biclonal 34.9%; oligoclonal 5.5%). Four of nine patients with T-ALL had clonal rearrangements of IgH. Clonal pattern of Igk-Kde were present in 59 (67%) of cases .biclonal 10%). VKI (25%) and VKIII (22.7%) were the most common type of rearrangement)
Conclusion: Clonal rearrangement pattern of IgH gene was similar to other populations. Using FRI and FRIII primers in multiplex PCR increased the rate of detection and reducing turnaround time. IgK was slightly more frequent than previous reports while VKI (25%) was the most common type.

قیمت : 20,000 ريال