شناسايي مولكولي ژن هاي ويرولانس در سويه هاي باليني سالمونلا تيفي موريوم به روش Multiplex-PCR و تعيين مقاومت آنتي بيوتيكي آنها

فيض، فصلنامه علمي پژوهشي دانشگاه علوم پزشكي و خدمات بهداشتي، درماني كاشان

دوره 20 - شماره 4

نوع مقاله: Original Article
چكيده:

سابقه و هدف: سالمونلا يك ارگانيسم روده­اي گرم منفي است كه عامل ايجاد بيماري و بروز مسموميت­ هاي غذايي در انسان مي­ باشد. هدف از مطالعه حاضر شناسايي ژن­ هاي Stn، sopB، slyA، spvc و Phop/Q در سويه­ هاي سالمونلا تيفي­موريوم جدا شده از نمونه­ هاي باليني به ­روش Multiplex PCR و تعيين الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي مي­ باشد.
مواد و روش ­ها: در اين مطالعه توصيفي-مقطعي و در يك بازه زماني 12 ماهه از ابتداي فروردين لغايت پايان اسفند 1394، تعداد 60 جدايه باليني سالمونلا تيفي­موريوم از بيمارستان شريعتي تهران جمع ­آوري شد. پس از تاييد سويه­ ها با استفاده از تست ­هاي استاندارد بيوشيميايي و ميكروبيولوژيكي، آزمون حساسيت آنتي­بيوتيكي روي محيط مولر هينتون آگار و بر اساس استاندارد (CLSI) انجام گرديد. آزمون multiplex-PCR جهت تشخيص ژن­ هاي حدت با استفاده از آغازگرهاي اختصاصي انجام شد.
نتايج: نتايج آزمون حساسيت آنتي­بيوتيكي نشان داد كه تمامي ايزوله­ ها داراي حساسيت به ايمي­ پنم، جنتامايسين و تري­متوپريم بودند. هم­چنين، يافته ­هاي مولكولي در خصوص فراواني ژن­ هاي slyA، Stn، sopB،Phop/Q  به ­ترتيب برابر 23/3، 30، 3/33 و 43/3 درصد گزارش گرديد، درحالي­ كه ژن spvC در جدايه ­هاي سالمونلا تيفي­موريوم مشاهده نگرديد.
نتيجه ­گيري: نتايج مطالعه حاضر حاكي از شيوع ژن­ هاي ويرولانس در سويه­ هاي باليني سالمونلا تيفي­موريوم مي ­باشد كه مي ­تواند به­ عنوان زنگ خطري براي انتشار اين ژن­ ها به ديگر سروتيپ ­هاي سالمونلا باشد. از آنجايي ­كه ژن­ هاي ويرولانس سالمونلاها روي جزاير بيماري­زايي سالمونلا (SPI) قرار دارند، شيوع بالاي اين ژن­ ها مي­ تواند به انتشار اين جزاير در بين سويه ­هاي سالمونلا كمك كند.

Molecular identification of virulence genes in clinical Salmonella typhimurium strains using the multiplex- PCR method and their antibiotic resistance profile
Article Type: Original Article
Abstract:

Background: Salmonella as an enteric, gram negative, facultative anaerobic, obligate parasite causes food poisoning in human. The aim of present study was to identify the virulence genes stn, sopB, slyA, spvc and Phop/Q in Salmonella typhimurium strains isolated from clinical specimens using multiplex PCR method and also the determination of their antibiotic resistance profile.
Material and methods: In this cross-sectional study during a 12 month period (April to March 2015) a total of 60 Salmonella typhimurium isolates were collected from Shariati hospital (Tehran, Iran). After the identification of strains, the antimicrobial susceptibility test was done using the disk diffusion agar test on Müller-Hinton agar media according to the Clinical and laboratory standards institute (CLSI) guidelines. Then the presence of virulence genes (e.g. stn, sopB, slyA, spvc and Phop/Q ) were identified using multiplex PCR method.
Results: These findings obtained from isolates showed the highest sensitivity to the Imipenem, Gentamicin, and Trimethoprim antibiotics . Distribution analysis of virulence for genes slyA, stn, sopb, Phop/Q showed the frequency of 23.3%, 30%, 3.33%5 and 43.3%, respectively. The spvC gene is not seen in any isolates.
Conclusion: The results of this study indicate that the prevalence of virulence genes in clinical Salmonella Typhimurium isolates can serve as an alarm for the prevalence of these genes to the other Salmonella serotypes. As the Salmonella virulence genes are located on the Salmonella pathogenicity islands, so the high prevalence of these genes can help to the dissemination of islands among the Salmonella strains.

قیمت : 20,000 ريال